一 : 药物分析辅导：牛黄解毒片含量测定方法

    牛黄解毒片处方为：人工牛黄5g，雄黄50g，石膏200g，大黄200g，黄芩150g，桔梗100g，冰片25g，甘草50g。
    2005《中国药典》牛黄解毒片含量测定项下：
    色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸（45：55：0.2）为流动相；检测波长为315nm。理论板数按黄芩苷峰计应不低于3000。
     供试品溶液的制备：取本品20片（包衣片除去包衣），精密称定，研细，取0.6g，精密称定，置锥形瓶中，加70%乙醇30ml，超声处理（功率 250w，频率33khz）20分钟，放冷，滤过，滤液置100ml量瓶中，用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀；精密量取2ml，置10ml量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀，即得。
    文献报道的以黄芩苷为指标的，如：吴丽群用hplc法测定牛黄解毒片中黄芩苷的含量，采用agilent-1100高效液相色谱仪，色谱柱为diamonsic18，200×4.6mm id，5μm，流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(55：45)，检测波长274nm，柱温室温，流速1.0ml/min。样品用70%乙醇超声处理，结果回收率为101.6%，rsd小于1.3%。
    李静瑜用hplc法测定牛黄解毒片中黄芩苷的含量，采用惠普hp1100高效液相色谱仪，色谱柱为hp hypersil-ods（5μm，125×4mm），流动相为甲醇-水-磷酸（45：55：0.2），检测波长315nm，柱温室温。
    陈胜璜用双波长法测定牛黄解毒片中黄芩甙的含量，采用日本岛津uv-265紫外分光光度计，双波长为240.2nm和278.0nm，样品用75%甲醇超声处理。
    以蒽醌类为含量测定指标的文献报道较多，如：李太平等用hplc法测定了大黄素、大黄酸的含量，采用岛津lc-10avp液相色谱仪，色谱柱为diamonsil (tm 钻石)，c18柱(20cm×4.6,5μm)，流动相为甲醇-水-磷酸(720：280：1)，检测波长254nm，流速1.5ml/min，柱温 30℃。样品用甲醇超声处理后用盐酸水解、氯仿提取，结果大黄素进样量在0.469～1.407μg时呈良好的线性关系(r=0.9992)，大黄酸在进样量为0.3125～0.9375μg时呈良好的线性关系(r=0.9992)，加样回收率分别为98.2 %(大黄素)， 98.4%(大黄酸)，rsd分别为0.43%(大黄素)，0.72%(大黄酸)。
    杨冬梅等用薄层扫描法测定了大黄素的含量，采用岛津cs-930薄层扫描仪，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）的上层溶液，硅胶g板，λs=440nm，λr=560nm。样品用乙醚超声处理。
     以胆酸为指标的，如：凌丽美用薄层扫描法测定了胆酸的含量，以异辛烷-正丁醚-冰醋酸(8：5：5)为展开剂，10%硫酸乙醇溶液为显色剂，双波长反射法锯齿扫描λs=390nm，λr=650nm。样品的处理方法：用甲醇超声提取，再用20%氢氧化钠回流提取，用稀盐酸调节ph值至2，用醋酸乙酯提取。

二 : SEO作弊方法和SEO作弊认定准则分析

1.关键词堆砌
为了增加关键词密度，在网页上大量重复关键词的行为，希望提高关键词密度，提高网页针对关键词的相关度。
常用手段：

a. 在标题标签、描述标签、关键词标签、图片的ALT-代替属性中重复放入大量关键词;
b. 在网页页脚部分摆放上多个与之相关的目标关键词或者长尾关键词。

2.桥页跳转
桥页也叫过渡页，是指一个页面打开之后会自动（或手动）转向主页，目的是希望这些以不同关键词为目标的桥页在搜索引擎中得到好的排名。

常用手段：通常是用软件自动生成大量包含关键词的网页，然后从这些网页做自动转向到主页。当用户点击搜索结果的时候，会自动转到主页。有的时候是在桥页上放上一个通往主页的链接地址，而不自动转向。

3.隐藏文字
在网页中放上含有关键词的文字，但这些字不能被用户所看到，只能被搜索引擎看到。
常用手段：

a.超小字号的文字;
b.与背景同样颜色的文字;
c.放在评论标签当中的文字;
d.放在表格input标签里面的文字;
e.通过样式表把文字放在不可见的层上面等。

4. 隐藏链接
隐藏链接和隐藏文字相似，但是区别是把关键词放在链接里面，而这个链接也是用户所看不到的。

4.隐藏页面
有的网页使用程序或脚本来检测来访问的是搜索引擎还是普通用户。如果是搜索引擎，网页就返回经过优化的版本网页，如果来访的是普通人，返回的是另外一个版本的页面。
常用手段：通过百度快照查看快照结果与人工访问结果不同认定为隐藏页面。

6. 欺骗性重定向
把用户访问的入口页面重定向至一个内容完全不同的页面，主要目的在于提升目标网页的流量。

7. 镜像站点复制
通过复制网站或网页的内容并分配以不同域名和服务器，以此欺骗搜索引擎对同一站点或同一网页进行重复索引，让搜索引擎蜘蛛做多余的工作。

8 .文中未涉及到的一切不合理优化作弊手段。

网站外部优化作弊和不合理优化方式认定标准：
外部优化主要的方式是获得一些高质量的外部链接，扩展外部链接，不一定是靠交换友情链接。有很多地方，可以获得外部链接。例如：BLOG评论、网页评论、留言本、论坛等等。在BLOG评论、网页评论、留言本、论坛等地方都可以经常看到黑帽SEO，下面例举的是黑帽SEO常用的链接作弊手段：

1.论坛群发跟帖作弊
利用论坛留言群发软件，在留言内容里加上所要优化网站的网址，以创造大量的外部链接。众所周知，论坛、博客等是最具人气的地方，也是搜索引擎光顾最为频繁的地方，创造这样的大量外部链接，为了达到蜘蛛顺着外部链接地址爬行到所要优化的网站，以达到加快更新所要优化网站的目的。而博客、论坛群发留言工具一般都是一些垃圾性质的网站

2 .BLOG群发作弊
跟论坛群发跟帖作弊原理相同。

3.BLOG群建作弊
BLOG群建作弊，就是通过程序或者人为的手段，大量申请BLOG帐户。然后通过发表一些带有关键词链接的文章，通过这些链接来推动关键词的搜索引擎排名。　

4. 作弊链接技术/恶意链接
典型的作弊链接技术包括：

a.链接工厂
.大宗链接交换程序
c.交叉链接

“链接工厂”(亦称“大量链接机制”)指由大量网页交叉链接而构成的一个网络系统。 这些网页可能来自同一个域或多个不同的域，甚至可能来自不同的服务器。一个站点加入这样一个“链接工厂”后，一方面它可得到来自该系统中所有网页的链接，同时作为交换它需要“奉献”自己的链接，籍此方法来提升链接得分，从而达到干预链接得分的目的。如今搜索引擎已经有完善的检查外链机制。只要发现，不管属有意还是无意，“链接工厂”中的所有站点都难逃干系。

5. 日志欺骗行为
通过对一些页面等级较高的站点进行大量的虚假点击以求名列这些站点的最高引者日志中，从而获得它们的导入链接。Google已然意识到这种行为并将对利用这种途径获得导入链接的站点采取相应措施。

6. 门域：
专为提高特定关键词在搜索引擎中的排名所设计的富含目标关键词的域名，然后重定向至其它域名的主页。由于搜索引擎一般忽略自动重定向至其它页的页面的检索，所以不提倡使用这种技术。

判定外部链接（亦称反向链接、导入链接）作弊标准：

1. 百度（www.baidu.com）：link:www.61k.com 目前外部链接信息760条，百度查外部链接不准确，但是用这种方法查论坛、博客的外部链接相当准确，如果短期内出现大量的论坛、博客留言链接，基本上可以认定采取了一些不正当的手法来获得大量的外部链接‘

2. 雅虎（www.yahoo.cn）：link:http://www.61k.com雅虎工具在几个搜索引擎里查询外部链接，是相当准确的，一般查到的是友情链接的外部链接，无法查出论坛、博客留言之类的外部链接；

3. 有道（www.youdao.com）：link:www.61k.com有道查外部链接也相当准确，跟雅虎原理差不多，也是一般查到的是友情链接的外部链接，无法查出论坛、博客留言之类的外部链接；

4. google(www.google.com)：link:www.61k.com能查到一小部分的外部链接，基本上所有的都涉及涵盖一些。

关于link和domain在不同的搜索引擎代表不同的含义

link：
百度：link 并不代表一个指令，只是一个普通的关键字。link:www.61k.com 搜索结果是包含这样一个关键字（www.61k.com）词组的所有网页，与其他普通关键词的搜索一样，并不完全是查找反向链接。

Google：查找的是反向链接，但只包含网站所有反向链接的少部分。推荐使用Google网站管理员工具查网站所有反向链接。

Yahoo：查找的是反向链接。

domain：
百度：查网页内容中包含某关键词。如：domain:www.61k.com 搜索结果是包含关键字词组（www.61k.com）的所有网页。同理，domain:et-china 指的是包含et-china的所有网页，与直接搜索 SEO 相似。如果要查找有多少个网页内容中包含你的网址，domain可以派上用场。

Google：domain并不代表一个指令。只是一个普通的关键字。

Yahoo：与 site:www.61k.com一样，查找域名下的所有收录网页。

三 : 药物分析辅导：清喉咽合剂含量测定方法

清喉咽合剂处方为：地黄180g，麦冬160g，玄参260g，连翘315g，黄芩315g。
    2005《中国药典》清喉咽合剂含量测定项下：
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.2%磷酸溶液（28：72）为流动相；检测波长为278nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于5000。
    供试品溶液的制备：取本品1.2g，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇适量，超声处理（功率135w，频率59khz）20分钟，取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取10ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
    文献报道的方法：
    李梦等用薄层扫描法测定清喉咽合剂中黄芩苷含量。薄层条件：硅胶gf254板，以正戊醇-甲醇-甲酸-水(7：1：1：1)为展开剂。扫描条件：双波长反射法锯齿扫描, 测定波长λs=290nm，参比波长λr=350nm，狭缝1.25mm×1.25mm，线性化系数sx=3。
    刘起中等采用双波长分光光度法测定清喉咽合剂中黄芩甙的含量：278nm、292nm。
    采用hplc法测定黄芩苷含量时，常用的流动相系统为甲醇-水-磷酸，如：顾金林用hplc法测定清喉咽合剂中黄芩苷含量。仪器：lc-10atvp液相色谱仪。色谱柱：hypersil ods c18 柱(4.6mm×250mm,5μm)；流动相：甲醇-水-磷酸(53：47：0.3)；流速：1.0ml/min；检测波长280nm。

四 : 药物分析辅导：银黄口服液含量测定方法

银黄口服液处方为：金银花提取物（以绿原酸计）2.4g，黄芩提取物（以黄芩苷计）24g。
    2005《中国药典》银黄口服液含量测定项下：
    金银花提取物：
    色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.4%磷酸溶液（10：90）为流动相；检测波长为327nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000。
    供试品溶液的制备：精密量取本品1ml，置50ml棕色量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
    黄芩提取物：
    色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸（50：50：0.2）为流动相；检测波长为274nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。
    供试品溶液的制备：精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取3ml，置25ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
    文献报道的方法，单独测定绿原酸的含量，如：
    陈志英用hplc法测定银黄口服液中绿原酸的含量。仪器为lc-10a型高效液相色谱仪。色谱柱为nova-pakc18（4.6×200mm），流动相为1%冰醋酸溶液-甲醇（50：50）；流速0.5ml/min，柱温25℃，检测波长329nm。样品用盐酸调节ph为2，用醋酸乙酯振摇提取。
同时测定绿原酸和黄芩苷的含量，一般以乙腈-不同浓度的磷酸溶液为流动相，梯度洗脱。如：
     钱江等用hplc法测定银黄口服液中绿原酸和黄芩苷的含量。仪器：hp1100高效液相色谱仪。色谱柱为luna c18 (2) ,4.6mm×150mm,5μm，流速1.0ml/min，检测波长318nm，乙腈（a）-0.1%磷酸溶液（b）为流动相，梯度洗脱：0min： a12%，b 88%；9min：a2%，b 88%；10min：a26%，b74%；20min：a26%，b74%；21min：a12%，b88%。样品用50%甲醇水溶液稀释。结果绿原酸线性范围为0.2568～2.0544μg ,平均回收率= 97.7%，rsd=0.8%；黄芩苷线性范围为0.9896～7.9168μg，平均回收率=98.0%，rsd=0.9%。
    曲秀梅等用hplc法测定银黄口服液中绿原酸和黄芩苷的含量。仪器：hp1100高效液相色谱仪。以kromasil c18分析柱为色谱柱；以0.05mol/l枸橼酸(ph=4，用三乙胺调)-乙腈(39：21)为流动相；流速1.0ml/min；检测波长 320nm。样品用流动相稀释。
    孙增先等用双波长比值光谱法测定银黄口服液中绿原酸和黄芩苷含量。依据绿原酸和黄芩苷的比值光谱特征，选择266和342nm作为测定波长。结果绿原酸线性范围为2～20μg/ml，回收率98.9%，rsd为1.58%，黄芩苷线性范围 2～16μg/ml，回收率100.4%，rsd为1.32%。
    张俊玮等用hplc法测定银黄口服液中绿原酸和黄芩苷的含量。仪器： hp1050高效液相色谱仪。色谱柱为ods hypersil 4.6×250mm；流动相为0min时甲醇-水(0：100)，20min时甲醇-水(100：0)；流速1.5ml/min；检测波长320nm；温度室温。样品用水稀释。  本文标题：定量分析方法-药物分析辅导：牛黄解毒片含量测定方法
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