一 : 卓洛乡发展农牧机专业服务组织的依据及措施

二 : 农业部印发2015年畜牧业工作要点：草牧业迎发展机遇

据农业部2月13日通知，农业部办公厅印发2015年畜牧业工作要点，其中重点提到畜牧业十三五发展规划编制和草牧业发展的推进。［www.61k.com］

工作要点重点提出，加快现代化畜牧业建设，统筹推进全国生猪产业发展规划、全国草食畜牧业“十三五”发展规划、全国饲料工业“十三五”发展规划等重点规划的编制工作。大力推进畜禽标准化规模养殖。加快建设现代畜禽牧草种业。加强畜禽遗传资源保护与开发，编制全国畜禽遗传资源保护和利用“十三五”规划。大力发展草牧业，总结草食畜牧业发展模式，研究制定《加快草食畜牧业发展的意见》，在农区、牧区、垦区、现代农业示范区和农村改革试验区，加快建设现代饲草料产业体系。引导优化畜牧业区域布局。切实保障畜产品质量安全，全面实施《饲料质量安全管理规范》。

另外还提到了切实加强草原保护建设，切实强化畜牧业信息化建设，夯实行业发展基础等工作。

在之前农业部发布的《关于进一步调整优化农业结构的指导意见》中，也重点提到了拓展优质牧草发展空间，草牧业发展得到突出强调。可见畜牧业发展也是2015年农业部的关键工作之一，相关领域的上市公司也有迎来发展机遇。A股上市公司中，大康牧业、雏鹰农牧、禾丰牧业、西部牧业等行业龙头值得关注。

三 : 长期以来优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的

长期以来优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程技术和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机。下面是科学加快速繁殖良种奶牛的两种方法，请据图回答：

(1)在试管牛E和克隆牛G的培育过程中都必须用到的两项技术是动物细胞培养和 _____________ (2)成熟的精子必须经过___________过程才具有受精能力。_________作用激活次级卵母细胞完成减数第二次分裂。 (3)科学家将人的α-抗胰蛋白酶基因转入上图的重构卵中，发现克隆牛G的乳汁中含人的α-抗胰蛋白酶，其原因是_______________。 (4)克隆牛G的性别是_____________，试管牛E的性别是________________。 (5)培育试管牛E时需对母牛B和母牛D注射激素，其目的是_____________，以便将胚胎移至母牛D的子宫内。

题型：读图填空题难度：偏难来源：0103 期末题

(1)胚胎移植 (2)获能 受精 (3)克隆牛G的乳腺细胞中含有人的抗胰蛋白酶基因，并进行了表达 (4)雌性 雌性或雄性 (5)使母牛B和母牛D同期发情

考点：

考点名称：体外受精和早期胚胎培养体外受精与胚胎的早期培养：

1、体外受精的原理：人工模拟体内环境（包括营养、温度、pH等），使初级卵母细胞成熟和精子获能，最
终完成受精和胚胎保存。
2、体外受精主要操作步骤
（1）卵母细胞的采集和培养：
方法一：对小型动物一般用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。
方法二：对大型动物是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精（或从刚屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞）
（2） 精子的采集和获能：在体外受精前，要对精子进行获能处理。
采集方法：假阴道法、手握法和电刺激法等。
获能方法：培养法和化学法。
（3） 受精：获能的精子和培养成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。
3、胚胎的早期培养：
（1）培养目的：精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。
（2）培养液成分：除一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。
（3）当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。不同动物胚胎移植的时间不同。（牛、羊一般要培育到桑椹胚或囊胚阶段才能进行移植，小鼠、家兔等实验动物可在更早的阶段移植，人的体外受精胚胎可在4个细胞阶段移植）。知识拓展：

1、早期胚胎是指可用于移植的胚胎，在原肠胚之前的囊胚、桑椹胚甚至更早的阶段。
2、受精后形成的受精卵需经早期发育培养，才能完成植入或着床。
3、胚胎早期培养液成分与动物细胞培养液成分基本相同，除无机盐、营养成分和调节物质外，还需要血清、抗生素等，两者都是液体培养基，但植物组织培养为固体培养基，其中加入琼脂，所需植物激素主要是生长素和细胞分裂素两大类。考点名称：基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序：

1、目的基因的获取
（1）目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因。
（2）获取方法：①从基因文库中获取；②人工合成（反转录法和化学合成法）；③PCR技术扩增目的基因。
2、基因表达载体的构建
（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
（2）组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。如图：

①启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。
②终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。
③标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。
（3）基因表达载体的构建过程：

3、将目的基因导入受体细胞
（1）转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
（2）常用的转化方法：

生物种类	植物细胞	动物细胞	微生物细胞
常用方法	农杆菌转化法	显微注射技术	Ca2+处理法
受体细胞	体细胞	受精卵	原核细胞
转化过程	将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA→表达	将含有目的基因的表达载体提纯→取卵（受精卵）→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物	Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子

（3）重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。
4、目的基因的检测和表达
（1）首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。
（2）其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。
（3）最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原--抗体杂交。
（4）有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。
知识点拨：

1、构建基因文库的目的为了在不知目的基因序列的情况下，便于获得所需的目的基因。
2、PCR技术：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。PCR扩增是获取目的基冈的一种非常有用的方法，也是进行分子鉴定和检测的一种很灵敏的方法。目的：通过指数式扩增获取大量的目的基因。
3、基因文库中不是直接保管相应基因，基因文库中的基因保存在受体菌中。
4、在基因工程的四个操作步骤中，只有第三步将目的基因导入受体细胞不需碱基互补配对，其余三个步骤都涉及碱基互补配对。
5、原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，有利于目的基因的复制与表达，因此常用大肠杆菌等原核生物作为受俸细胞。
6、植物细胞的全能性较高，可经植物组织培养过程成为完整植物体，因此受体细胞可以是受精卵也可以是体细胞；动物基因工程中的受体细胞一般是受精卵。
7、转化的实质是目的基因整合到受体细胞染色体基因组中，从而使受体生物获得了新的遗传特性的现象，从其变化的实质看，这种变异属于可遗传变异中的基因重组。 知识拓展：

1、基因文库的构建：
（1）概念
①基因组文库：含有一种生物的全部基因。将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因组文库。
②cDNA文库：只包含了一种生物的部分基因。
（2）构建过程

基因组文库的构建	cDNA文库的构建

2、人工合成目的基因
（1）反转录法：

（2）人工合成目的基因

3、PCR技术扩增目的基因
①原理：DNA双链复制
②过程：
第一步：加热至90～95℃DNA解链；
第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；
第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。考点名称：体内受精和早期胚胎发育

体内受精和早期胚胎发育：

1、精子和卵子的发生：

项目	精子	卵子
场所	睾丸曲细精管	卵巢
时间	初情期开始	胎儿时期性别分化以后
过程		（在卵细胞膜和透明带的间隙有两个集体是判断卵子受精的标志）
结果	4个精子	1个卵细胞；3个极体
MⅠ和MⅡ是否连续	是	否

2、受精作用
(1)受精作用的场所：输卵管。
(2)受精前的准备阶段
①精子获能：精子必须在雌性动物的生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力的生理现象。
②卵子的准备：在输卵管中发育达到减数第二次分裂的中期，才具备与精子受精的能力。
(3)受精阶段——四步曲
第一步：精子穿越放射冠和透明带。顶体反应使顶体内的酶释放出来并溶解放射冠内的卵丘细胞之间的物质，透明带反应是防止多精入卵受精的第一道屏障。
第二步：精子进入卵细胞腆。卵细胞膜反应是防止多精入卵受精的第二道屏障。
第三步：原核形成。雄原核形成和雌原核形成。
第四步：合子形成。雌雄原核融合形成合子（受精卵）。
3、胚胎发育：
（1）过程：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原肠胚。
①卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；
②桑椹胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）；
③囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔（注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化）；
④原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。（细胞分化在胚胎期达到最大限度）
（2）图示：

知识点拨：

受精过程中的几个反应：
（1）顶体反应：精子释放顶体酶溶解卵丘细胞之间的物质，穿越放射冠。
（2）透明带反应：顶体酶可将透明带溶出孔道，精子穿入，在精子触及卵黄膜的瞬间阻止后来精子进入透明带的生理反应（它是防止多精子入卵受精的第一道屏障）；
（3）卵黄膜的封闭作用：精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程（它是防止多精子入卵受精的第二道屏障）；精子尾部脱落，原有核膜破裂形成雄原核，同时卵子完成减二分裂，形成雌原核（注意：受精标志是第二极体的形成；受精完成标志是雌雄原核融合成合子）。
知识拓展：

1、成熟的精子并不具备受精能力，必须获能后才具备受精能力。
2、卵细胞形成过程中，减数第一次分裂在排卵前后完成，而减数第二次分裂在受精时完成。 本文标题：夏商周农业和畜牧业的发展-卓洛乡发展农牧机专业服务组织的依据及措施
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