一 : 粪链球菌：粪链球菌-生物学性状，粪链球菌-生理特性

粪链球菌又叫粪肠球菌。应用C多糖抗原，根据兰氏血清学分类，可将链球菌分成许多群。粪链球菌属于D群。D群链球菌分肠球菌和非肠球菌两类。前者包括粪链球菌、屎链球菌和坚忍链球菌，后者有牛链球菌和马肠链球菌。粪链球菌为畜禽饲料添加剂，可防治幼畜苗禽因肠道菌群失调引起的下痢，具有调节肠道正常菌群失调和促进生长的作用。

粪链球菌_粪链球菌 -生物学性状

粪链球菌又叫粪肠球菌，其菌体形态为链球或球状，菌体直径大小0．3～0．7μm，无芽孢；稀释后在肉汤琼脂平板上形成的菌落圆形、乳白色，表面凸起湿润，有光泽，边缘整齐。大多数成双或短链状排列，通常不运动。

在丰富培养基上菌落大而光滑，直径1~2mm，全缘，罕见色素。其营养要求低，在普通营养琼脂上也可生长。能在10~45℃pH值9.6或含6.5%NaCl 肉汤培养基中生长，并能耐65℃

30min。它可利用精氨酸为能源，发酵山梨醇，不发酵阿拉伯糖。在简单的培养基上生长不需叶酸。

粪链球菌_粪链球菌 -生理特性

1、粪链球菌分泌的乳酸为L型乳酸，又称为自然乳酸或生理乳酸，可完全被动物吸收利用。乳酸杆菌分泌的乳酸L型和D型都有，但D型则不能被动物吸收利用，双歧杆菌分泌的乳酸也是L型乳酸。

在动物的肠道里，pH值可显著影响微生物的数量与类型，大部分来自食物和唾液里的微生物在肠道的酸性环境中存活很少，主要是粪链球菌和乳酸菌。耐酸和不耐酸的细菌在肠道中还会受到不同的抗生因子如酸、蠕动、抗体等的影响，但主要是pH值影响最大。而粪链球菌可在肠内形成生物薄膜附着在肠道粘膜上，可以在肠道内发育、生长、繁殖，繁殖时间很短，19min分裂一次。

粪链球菌还可把部分蛋白质分解成酰胺和氨基酸，把大部分的碳水化合物的无氮浸出物转化为乳酸，而且使饲料里的纤维变软，所以饲料的转化吸收率就较高。粪链球菌分解的这些特殊营养成分弥补了常规饵料的营养缺陷，对各种养殖动物幼体起到了十分重要的营养强化和促生长作用。

2、粪链球菌产生的抗菌物质大多是肽或蛋白质，被称为细菌素。粪链球菌可分泌2种类细菌素，1类仅只是对相关的菌有抑制作用，抗菌谱较窄，可阻碍病原微生物接触肠粘膜细胞；另1类具有广谱抗菌活性，它们对致病菌如：沙门氏菌、致贺氏菌和假单孢菌都有很好的抑制作用。所以，长期在饲料中添加粪链球菌可以减少养殖动物肠炎等疾病的发生。

粪链球菌在生长和代谢过程中产生对养殖动物有益的营养物质，如乳酸、氨基酸、维生素、酶及抑菌物质。在饲料添加中，既有防腐作用，又增加饲料的风味，促进养殖动物的食欲。

3、饲料中添加粪链球菌可减少养殖中有机物和矿物质排泄量，有效地减少水质污染。

在水产养殖水体中，添加了粪链球菌不仅有利于提高饲料的消化率，同时也相应降低了排泄物中的氨态氮的浓度，减少了排泄物的不消化物，改善了饲养环境，减少了污染。

粪链球菌除了具有一般微生物所产生的有关酶系外，它还有一些特殊的酶系，正因为有了这些酶系，才赋予它重要的生理功能。由于饲料中饼粕、麦麸等农副产品中的植酸磷含量较高，对钙等矿物质元素利用造成影响，而在粪链球菌的生理作用下通过催化、水解等反应分泌出的L-乳酸，它可以对钙质合成L-乳酸钙，促进养殖动物对钙质的吸收。

粪链球菌_粪链球菌 -致病性

粪链球菌引起的感染有尿路感染、化脓性腹部感染、败血症、心内膜炎和腹泻发烧等。其中败血症最常继发于生殖泌尿性感染，皮肤、胆道、肠道等感染也可作为原发病灶。从天然乳清培养物中分离的菌株，能产生1种细菌素，叫肠球菌素（Enterocin），对单增李斯特氏菌有杀灭作用。

粪链球菌_粪链球菌 -流行病学

粪链球菌为条件致病菌，它来源于人和温血动物的粪便，偶尔出现于感染的尿道及急性心内膜炎。它能够通过食品对人类造成感染，因而常见于许多食品，如火腿肠、炸肉丸、布丁及经过巴氏消毒的牛奶等，粪链球菌进入食物链的主要原因是不卫生的加工条件所致的，一般与直接的粪便感染无关。粪链球菌引起的感染大多是由于它的侵袭所造成，感染剂量较高，一般大于10⁷个细菌。人、禽感染率最高，亦见于猪、牛、马、山羊、绵羊及兔。

粪链球菌_粪链球菌 -检验与控制

检验

样品制备取25g或25mL样品，放入225mL灭菌生理盐水中，充分混匀，制成1：10样品稀释液。根据样品的污染程度，制成适当的10倍递增稀释液。

a.多管法：

用适当的稀释液接种一套叠氮化钠葡萄糖肉汤管。接种量为1mL或以下的，使用10mL单料管；接种量为10mL，使用10mL双料管。35℃培养24-48h，并检查记录各管的混浊情况。用接种环将浑浊管中的培养物划线于PSE平板上，倒置平板于36℃培养24h。平板上出现的带棕色环的黑色菌落，确证为粪链球菌。根据接种的样品量和确证为是粪链球菌的管数，查MPN表，报告每克样品中的粪链球菌MPN值。

b.滤膜法：

倾注融化的4-5mL的KF琼脂于平板上，若平板表面有气泡，可用火焰灼除。根据样品的污染程度，使用样液的量为100，10，1.0，0.1或0.01mL。使用灭菌滤膜过滤样液，以能在滤膜上生长出20-100个菌落为宜。将滤过样液的滤膜紧贴在KF琼脂培养基表面上，避免出现气泡。倒置平板于36℃培养48h。粪链球菌在KF平板滤膜上形成暗红色至粉红色菌落。将典型菌落接种于脑心浸液斜面上，36℃培养48h。用其培养物做过氧化氢试验，过氧化氢浓度为3%，阳性反应者为非粪链球菌群细菌。将阴性反应者接种于脑心浸液肉汤，置45.5℃培养48h；同样方式接种一管胆盐肉汤，置36℃培养3天。在上述2种情况下生长者为粪链球菌。选择生长20-100个菌落的滤膜，根据所使用的样品量，计算出样品每克（毫升）中的粪链球菌数。

c.平板计数法：

取1mL适当稀释液加入培养皿内，倾入12-15mL的KF或PSE培养基，转动平板充分混合。凝固后置36℃培养，KF平板培养48h，PSE平板培养24h。粪链球菌在KF平板上形成暗红色至粉红色菌落，边缘整齐，琼脂表面下菌落呈椭圆或晶体状；在PSE平板上形成带棕色环的棕黑色菌落。选择有30-300个菌落的平板进行记数。按粪链球菌数/g(mL)报告结果。

粪链球菌_粪链球菌 -控制

由于粪链球菌可通过食物对人类造成感染，所以应从以下几个方面加以控制：

加强生产区域的卫生管理，由于粪链球菌主要来源于人畜粪便，所以厕所要合理布局，避免粪便直接污染；生产人员要严格执行个人卫生制度。

在加工过程中，严格注意每个关键点的控制，掌握好诸如温度、水源卫生等要素。对摆放时间过长的食物，如熟食制品、牛奶或奶制品等，要彻底加热再食用，春夏季尤其要注意。

粪链球菌_粪链球菌 -用法与用量

作饲料添加剂，按规定比例拌入饲料，雏鸡饲料0.1％～0.2％、成年鸡饲料0.1%、子猪饲料0.1％～0.22％、肉猪饲料0.1％、兔饲料0.1％～0.2％。或子鸡每日每羽0.1～0.22g，子猪每日每头0.2～0.5g。治疗量加倍。

粪链球菌_粪链球菌 -注意事项

粪链球菌不得与抗菌药物同时使用，切勿用50℃以上热水溶解。

粪链球菌_粪链球菌 -储藏

避光干燥阴凉处，室温下保存，有效期为六个月。

二 : 粪链球菌概述

粪链球菌概述

粪链球菌（streptococcus faecium）是目前专用的微生物青贮接种剂主要菌种之一, ，属兼性厌氧革兰氏阳性菌。(www.61k.com)它经过系列工艺制成的微生物制剂直接投喂养殖动物后, 有利于改善肠道内微生态平衡, 防治动物肠道菌丛区系紊乱, 有分解蛋白质为水肽、合成B 族维生素等功效。它能促进养殖动物的免疫反应, 提高抗体水平, 增强巨嗜细胞的活性。

一、粪链球菌的生物学性状

粪链球菌又叫粪肠球菌，其菌体形态为链球或球状，菌体直径大小0.3μm-0.7μm之间，无芽孢，稀释后在肉汤琼脂平板上形成的菌落圆形，乳白色，表面凸起湿润，有光泽，边缘整齐，大多数成双或短链状排列，通常不运动。

为D族链球菌中肠球菌的代表种。通常所谓的粪链球菌（fecal streptococcus）包括粪链球菌、粪链球菌液化亚种、粪链球菌产酶亚种、尿链球菌、牛链球菌、马肠链球菌、鸟链球菌等。其中前四种主要存在于人肠道，称肠球菌（enterococcus）；后三种主要存在于家畜及家禽的粪便内。

其营养要求低，在普通营养琼脂上也可生长。能在10℃或45℃ pH 9.6或含

6.5%NaCl肉汤培养基中生长，并能耐65℃ 30分钟。它可利用精氨酸为能源，发酵山梨醇，不发酵阿拉伯糖。

二、粪链球菌的生理特性。

1、粪链球菌分泌的乳酸为L型乳酸, 又称为自然乳酸或生理乳酸, 可完全被动物吸收利用。乳酸杆菌分泌的乳酸L 型和D 型都有, 但D 型不能被动物吸收利用, 双岐杆菌分泌的乳酸也是L 型乳酸。在动物的肠道里, pH 值可显著影响微生物的数量与类型, 大部分来自食物和唾液里的微生物在肠道的酸性环境中存活很少,仅剩下大约103/mL 细菌, 主要是粪链球菌和乳酸菌、耐酸和不耐酸的细菌在肠道中还会受到不同的抗生因子如酸、蠕动、抗体等的影响, 但主要是pH 影响最大。而粪链球菌可在肠内形成生物薄膜附着在肠道粘膜上, 可以在肠道内发育、生长、繁殖,繁殖时间很短,19分钟分裂一次。

粪链球菌还可把部分蛋白质分解成酰胺和氨基酸, 把大部分的碳水化合物的无氮浸出物转化为乳酸, 而且能使饲料里的纤维变软,所以饲料的转化吸收率就比较高.粪链球菌分解的这些特殊营养成分弥补了常规饵料的营养缺陷, 对各种养殖动物幼体起到了十分重要的营养强化和促生长作用。

2、粪链球菌产生的抗菌物质大多是肽或蛋白质,被称为细菌素。粪链球菌可分泌两类细菌素, 一类仅只是对相关的菌有抑制作用, 抗菌谱较窄, 可阻碍病原微生物接触肠粘膜细胞; 另一类具有广谱抗菌活性, 它们对致病菌如: 沙门氏菌、致辞贺氏病和假单孢菌都有很好的抑制作用。所以, 长期在饲料中添加粪链球菌可以减少养殖动物肠炎等疾病的发生。粪链球菌在生长和代谢过程中产生对养殖动物有益的营养物质,如乳酸、氨基酸、维生素、酶及抑菌物质。在饲料添加中, 既有防腐作用, 又增加饲料的风味, 促进养殖动物的食欲。

3、饲料中添加粪链球菌可减少养殖中有机物质排泄量,有较地减少水质污染。在水产养殖水体中,添加了粪链球菌不仅有利于提高饲料的消化率,同时又相应降低了排泄物中的氨态氨的浓度,减少了排泄物的不消化物, 改善了饲料环境, 减少了污染。粪链球菌除了具有一般微生物所产生的有关酶外, 它还有一些特色的酶系, 正因为有了这些酶系, 才赋予它重要的生理功能。由于饲料中饼粕、麦麸等

粪链球菌 粪链球菌概述

农副产品中的植酸磷含量较高, 对钙等矿物质元素利用造成影响, 而在粪链球菌的生理作用下通过催化、水解等反应分泌出L- 乳酸, 它可以对钙质合成L-乳酸钙, 促进养殖动物对钙质的吸收。（www.61k.com]

三、在饲料添加剂的研究过程中, 粪链球菌添加剂是近年来发展起来的新生事物,在研究进展中还存在一些问题, 主要原因是:菌种失活、菌种选育、

1、菌种失活

菌种失活导致功效降低是目前应用微生物饲料添加剂的问题之一, 除微生物制剂生产中的因素外, 饲料加工中的高温、机械、制粒等操作以及养殖动物的肠道环境、抗生素的使用等因素都与菌种失活有关。国外的一些研究机构已取得了很好的发展, 国内的一些公司和高校科研中心也在研究, 也取得了初步成功。

2、菌种的选育

粪链球菌的菌种不同, 它对不同养殖物和不同饲粮类型的作用效果也不同, 因此在发展微生物饲料添加剂中, 根据养殖对象、饲粮的特异性来选育菌种, 才能达到最佳的使用效果, 另外, 现有一些实验结果表明, 在低水平的日粮中使用粪链球菌饲料添加剂的效果比在营养较为全面的全价配合日粮中使用效果更为显著。因此, 选育在高日粮水平条件下应用的菌种, 也是菌种选育的方向之一。

3、质量监督的制定和管理

四、影响粪链球菌生长的因素（培养基成分）

1、碳氮比

2、氨基酸

3、微量元素

4、维生素

微生物饲料添加剂不仅具有与抗生素饲料添加剂相似的有益作用, 而且无毒、无副作用、无残留、无抗药性, 同时也不污染环境, 所以, 微生物饲料添加剂必将逐步发展, 并取得广泛的应用。

链球菌选择性琼脂培养基

1. 成分

胰化多价蛋白胨Tryptose 10.0g

眎蛋白胨 10.0g

葡萄糖 1.0g

蔗糖 50.0g

磷酸氢二钾 4.0g

锥虫蓝（Trypan blue） 0.075g

结晶紫 0.0008g

琼脂 15.0g

水 1000ml

2. 制法：除色素外，将各成分加热溶于1L水中，调至pH7.0,加入色素（配成适当溶液）、分装玻瓶，于121℃灭菌15min，倾注灭菌平皿。

KF链球菌琼脂培养基

1. 成分

眎蛋白胨 10.0g

粪链球菌 粪链球菌概述

酵母浸膏 10.0g

氯化钠 5.0g

甘油磷酸钠 10.0g

麦芽糖 20.0g

乳糖 1.0g

叠氮钠 0.4g

琼脂 20.0g

溴甲酚紫 0.015g

水 1000.0ml

2. 制法：除指示剂外，将各成分加热溶于1L水中，调至pH7.2加入溴甲酚紫和1%TTC水溶液10ml，混匀，煮沸5min，不需高压灭菌。［www.61k.com］过度加热将降低pH值，影响培养基效能。 若减去琼脂和TTC，则制成KF链球菌肉汤培养基

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